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人ELISA試劑盒揭示蛋白活化機制

2013-11-26 [1042]

人源SAMHD1蛋白(即包含SAM和HD結(jié)構(gòu)域的I型蛋白)人ELISA試劑盒在人樹突細(xì)胞中發(fā)現(xiàn),并于2009年被認(rèn)定是人體自身免疫疾病Aicardi-Goutières綜合癥(AGS)相關(guān)蛋白。證明SAMHD1蛋白是一種全新的病毒抑制因子。SAMHD1能夠強有力地對抗例如HIV和SIV等反轉(zhuǎn)錄病毒。其具有的dNTPase活性與這一逆轉(zhuǎn)錄病毒限制功能有關(guān)。SAMHD1可通過耗盡dNTP水平抑制不分裂骨髓細(xì)胞和靜息CD4+細(xì)胞中的反轉(zhuǎn)錄病毒。這標(biāo)志著病毒學(xué)特別是HIV領(lǐng)域又一輪研究熱潮的開始。

證實SAMHD1蛋白也是LINE-1元件和LINE-1介導(dǎo)的Alu/SVA反轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座的一個有力調(diào)控因子。由此站在全新角度提出假設(shè):人ELISA試劑盒SAMHD1蛋白很可能也是人類自身逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的抑制因子,且這種抑制與SAMHD1蛋白抑制HIV/SIV逆轉(zhuǎn)錄病毒的感染采用的是極為不同的機制。該團隊還發(fā)現(xiàn)含有AGS相關(guān)突變的SAMHD1蛋白其抑制逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的能力表現(xiàn)出不同程度的下降,暗示逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子的活性和免疫疾病AGS之間的確存在。這些現(xiàn)象表明抑制逆轉(zhuǎn)錄轉(zhuǎn)座子這一能力非常可能是哺乳動物SAMHD1蛋白參與宿主免疫調(diào)控的重要機制之一。

研究人員報告了分辨率為1.8埃,同源四聚體SAMHD1與變構(gòu)激活體及底物dGTP/dATP的復(fù)合物晶體結(jié)構(gòu)。這一結(jié)構(gòu)表明3個亞基和2個dGTP/dATP分子在每個變構(gòu)位點協(xié)同作用,是dGTP依賴性的四聚體SAMHD1形成的必要條件。變構(gòu)dGTP結(jié)合誘導(dǎo)了SAMHD1活性位點構(gòu)象改變,人ELISA試劑盒使得其能夠與底物更穩(wěn)定地相互作用,由此解釋了dGTP誘導(dǎo)SAMHD1 dNTPase活性的機制。研究人員還證實變構(gòu)位點dGTP結(jié)合殘基突變可影響四聚體形成,dNTPase活性和它的HIV-1限制能力。此外,dGTP觸發(fā)的四聚體形成對于SAMHD1介導(dǎo)LINE-1調(diào)控也極其重要。
 
 

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