换热器,板式换热器,换热器厂家-无锡雁达换热器科技有限公司

首頁 > 技術文章 > 酶聯接免疫吸附劑測定[ELISA]的原理和類型介紹

酶聯接免疫吸附劑測定[ELISA]的原理和類型介紹

2013-12-05 [1035]

1.1. ELISA試劑盒的原理
 
ELISA的基礎是抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性,酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。在測定時,受檢標本(測定其中的抗體或抗原)與固相載體表面的抗原或抗體起反應。用洗滌的方法使固相載體上形成的抗原抗體復合物與液體中的其他物質分開。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高,間接地放大了免疫反應的結果,使測定方法達到很高的敏感度。
 
1.2. ELISA試劑盒的類型
 
ELISA可用于測定抗原,也可用于測定抗體。在這種測定方法中有三個必要的試劑:(1)固相的抗原或抗體,即"免疫吸附劑"(immunosorbent);(2)酶標記的抗原或抗體,稱為“酶聯物”、“結合物”(conjugate);(3)酶反應的底物。根據試劑的來源和標本的情況以及檢測的具體條件,可設計出各種不同類型的檢測方法。用于臨床檢驗的ELISA主要有以下幾種類型:
 
雙抗體夾心法是檢測抗原zui常用的方法,操作步驟如下:
 
1) 將特異性抗體與固相載體聯結,形成固相抗體。洗滌除去未結合的抗體及雜質。
 
2) 加受檢標本,保溫反應。標本中的抗原與固相抗體結合,形成固相抗原抗體復合物。洗滌除去其他未結合物質。
 
3) 加酶標抗體,保溫反應。固相免疫復合物上的抗原與酶標抗體結合。*洗滌未結合的酶標抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢抗原的量相關。
 
4) 加底物顯色。固相上的酶催化底物成為有色產物。通過比色,測知標本中抗原的量。
 
在臨床檢驗中,此法適用于檢驗各種蛋白質等大分子抗原,例如HBsAg、HBeAg、AFP、hCG等。只要獲得針對受檢抗原的異性抗體,就可用于包被固相載體和制備酶結合物而建立此法。如抗體的來源為抗血清,包被和酶標用的抗體分別取自不同種屬的動物。如應用單克隆抗體,一般選擇兩個針對抗原上不同決定簇的單抗,分別用于包被固相載體和制備酶結合物。這種雙位點夾心法具有很高的特異性,而且可以將受檢標本和酶標抗體一起保溫反應,作一步法檢測。

 

主站蜘蛛池模板: 日本一级片在线观看 | 美女张开腿让男人桶爽 | 亚洲综合干 | 91国内精品久久久久影院优播 | 欧美精品久久久久久久久大尺度 | 26uuu成人人网图片 | 正在播放的国产a一片 | 日韩精品一区二区亚洲av | 国产精品永久在线 | 久久久久琪琪去精品色村长 | 一个人看的视频免费观看www | 成年男女男免费视频网站不卡 | 高清破外女出血av毛片 | 手机一级片 | 黄色毛片在线观看 | 免费看性片 | 在线观看黄网 | 女人高潮内射99精品 | 中文字幕无码免费久久99 | 欧美成人一区二区三区在线视频 | 久久激情综合网 | 看黄视频软件 | 国产在线精品一区二区三区直播 | 四虎影视库国产精品一区 | 99精品免费在线观看 | 四虎必出精品亚洲高清 | 一本一本久久a久久精品综合 | 亚洲国产精品无码久久sm | 色小说网站 | 亚洲最新网址 | 九色 91| 四虎精品成在线播放 | 成人影院久久久久久影院 | 国产精品卡一卡二卡三 | 一二三四在线观看免费高清中文网 | 久久最新免费视频 | 国产黄页在线观看 | 毛片免费全部完整播放 | 黄色软件免费观看 | 午夜伦理影院 | 亚洲av无码一区二区二三区入口 |