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ELISA試劑盒實驗檢測影響因素

2014-04-30 [919]

ELISA試劑盒是目前檢驗科常用的免疫學檢測方法之一,其操作簡單,無須特殊設備,使其在各級醫院都有應用。
但是,如果忽視了影響其結果的因素,難免會造成假陰性或假陽性,因此,了解影響實驗的因素,減少差錯事故的發生是極其必要的。
1實驗室操作人員的素質因素
實驗室人員的素質主要包括五個方面:思想素質、文化素質、技術素質、心理素質、身體素質。首先應具備一個良好的思想素質,因為我們的服務對象是人,我們的道德水平直接關系到人們的健康和生命安危,如果馬馬虎虎。三心二意,難免會有差錯事故發生,我們應該熱愛專業,耐心細致。在工作中如標本混淆、張冠李戴、報告單發錯等都有可能造成嚴重后果;其次文化素質和技術素質,我們要熟練掌握本專業的基本理論和基本技術,認真學習新理論新知識,努力提高自己的業務水平,創造一個能夠勝任本職工作的技術平臺。良好的心理素質就是要勇于面對工作生活中的挫折,在繁忙工作中,有條不紊,冷靜沉著的處理有關事務。人員素質問題是影響檢驗結果的首要因素。
2 ELISA試劑盒標本處理因素
實驗室人員收到標本后應認真查對,對不符合要求的標本和申請單要拘收,合格標本要及時分離血清,避免溶血,提取血清時不應混有大量纖維蛋白或細胞成分。對不能及時檢測的標本要妥善保存于4℃冰箱,做好原始記錄,標本管上標上待檢者姓名、日期。從冰箱取出的標本要預溫至室溫,對冰凍的樣品要融化好,并充分混勻再用。
3 操作過程的影響因素
3.1 操作前應對實驗的物理參數有充分的了解,如環境溫度(保持在18 C~25℃)、反應孵育溫度和孵育時間、洗滌的次數等,要先查看水育箱溫度,是否符合要求。
3.2 正確使用加樣器加樣器應垂直加入標本或試劑,避免刮擦包被板底部。加樣過程中避免液體外濺,血清殘留在反應孔壁上,加樣器吸頭要清洗干凈,避免污染,加樣次序要與說明書一致,否則可導致結果錯誤,實驗重復性差。
3.3 手工洗板加洗液時沖擊力不要太大,洗滌次數不要超過說明書推薦的洗滌次數,洗液在反應孑L內滯留的時間不宜太長。不要使洗液在孑L間竄流,造成孔問污染,導致假陰性或假陽性。
3.4 要保證加液量一致 我們在使用時感覺滴瓶加液不如加樣器好,滴瓶不易控制加液量不準,造成顯色不統一,判斷錯誤。
3.5 顯色液量不可過多 加樣的工作環境不能處于陽光直射的環境下,加顯色系統后要避光反應,顯色液量不能過多,以免顯色過強。
4 ELISA試劑盒的影響因素
應選用有國家批準文號,質量靠得住的產品,不能圖便宜,忽視質量保證。試劑應妥善保存于4℃冰箱內,在使用時先平衡至室溫,不同批號的試劑組分不宜交叉使用。試劑開啟后要在一周內用完,剩余的試劑下次用時應先檢查是否變質,,顯色劑如被污染變色將造成全部顯色,導致錯誤結果。
過期的試劑不宜再用,若別無選擇,應做好雙份質控品的監測,確保結果的可靠性。
5 采取措施,避免差錯事故的發生

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