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酶聯(lián)免疫試劑盒使用說明書

2014-05-19 [1473]

酶聯(lián)免疫試劑盒使用說明書
本試劑盒僅供體外研究使用、不用于臨床診斷!
預(yù)期應(yīng)用
ELISA法定量測定大鼠血清、血漿或其它相關(guān)生物液體中PCT含量。 
酶聯(lián)免疫試劑盒實驗原理
用純化的PCT抗體包被微孔板,制成固相載體,往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的PCT抗體、HRP標記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物(TMB)顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的。顏色的深淺和樣品中的PCT呈正相關(guān)。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。 
酶聯(lián)免疫試劑盒組成及試劑配制
1、酶標板:一塊(96孔) 
2、標準品(凍干品):2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1,000pg/ml,然后做系列倍比稀釋液(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配成1,000pg/ml,500pg/ml,250pg/ml,125pg/ml,
62.5pg/ml,31.2pg/ml,15.6pg/ml,樣品稀釋液直接作為空白孔0pg/ml。如配制500pg/ml標準品:取0.5ml(不要少于0.5ml)1,000pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf
管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、樣品稀釋液:1×20ml。
4、檢測稀釋液A:1×10ml。
5、檢測稀釋液B:1×10ml。 
6、檢測溶液A:1×120/瓶(1:100)。臨用前以檢測稀釋液A1:100稀釋(如:10檢測溶液A/990檢測稀釋液A),充分混勻,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。 
7、檢測溶液B:1×120/瓶(1:100)。臨用前以檢測稀釋液B1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。 
8、底物溶液:1×10ml/瓶。 
9、濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10、終止液:1×10ml/瓶(2mol/LH2SO4)。
11、覆膜:5張
12、使用說明書:1份 自備物品 1、酶標儀(建議儀器使用前提前預(yù)熱)2、微量加液器及吸頭,EP管3、蒸餾水或去離子水,濾紙 

 

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