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細胞研究*的細胞體積分析

2010-07-06 [1874]

生物、藥物等許多的研究均需要通過觀察細胞體積的變化或細胞數目增減的來判斷和評估實驗的效果。由于細胞所處環境的改變可促使其自身體積做出相應的變化,以便適應改變后的環境大致新的平衡。由于并不能清晰地知道該種細胞體積變化規律,因此必須檢測其體積或細胞數目隨條件、時間的變化。
  
細胞的發育與細胞分裂周期級數遞增均需要連續不斷的細胞增殖。
在培養液中正在增殖的細胞在其分裂前其體積將增大至原體積的兩倍。然而對細胞發育與分裂的速度作如何調整才能保證細胞體積的不變并不明確。因此,測量細胞的體積的變化對了解與控制細胞的發育和周期非常重要。

細胞的死亡
 
細胞的增殖與細胞的死亡之間需要一個精細的平衡以保持足夠的細胞數量。該種平衡容許細胞作*的狀態調節以適應各樣機能變化的需求。細胞死亡有兩種清晰的機制,壞死與凋亡。壞死是一個病理生理的機制,包括細胞膨脹以及細胞膜破裂而釋出內容物。凋亡則是一個程序式死亡的機制。凋亡的特征之一就是細胞收縮。細胞有缺陷的凋亡與過度凋亡,兩者同樣會導致嚴重疾病。
 
 
滲透壓的補償
 
任何種類的細胞都有可能因處于不利環境而死亡。細胞猶如多孔的網篩極易因滲入已溶解于周圍環境的化學物而使滲透壓受影響。細胞內外環境中該些溶解物顆粒數目的不平衡,將會導致水份透進細胞而使其體積漲大,或者是水份從細胞滲出使其體積收縮。
當細胞或微生物遭遇環境的變化,它們都會嘗試通過自身調節來適應新的環境。

細胞平均體積(MCV)的變化
 
當細胞或微生物遭受環境變化時,它們將通過自身調整以圖適應新的環境。一些例子中細胞需要改變自身體積以便達到適合的目標。
由貝克曼庫爾特公司出品的Multisizer 3 庫爾特細胞特性分析儀是目前zui的細胞體積、細胞計數的分析儀器,應用文獻多不勝數。無可逾越的技術更使Multisizer 3 成為分辨率zui高的儀器。國外的用戶統計表明,Multisizer 3 已成為細胞實驗室*的研究工具。,

自*•庫爾特發明 庫爾特原理 以來,該原理已廣泛應用于材料、生物、醫學、制藥等眾多的領域。目前生物領域的細胞計數標準就是庫爾特原理。美國材料實驗協會ASTM將庫爾特原理定為生物細胞計數的標準(ASTM-F2194)。血液學標準化委員會亦庫爾特原理為計算紅細胞與白細胞的標準實驗室方法 (Clin. lab. Haemat. 1988. 10,203-212.)。

作為庫爾特原理及技術應用的*,美國貝克曼庫爾特公司始終保持著技術的優勢。†庫爾特計數儀(Coulter Counter)無論在研究還是在質量控制的應用均具有深遠的影響力。在的研究機構及其發表的學術文獻當中,庫爾特計數儀均擔當著*的角色。

多年來貝克曼庫爾特公司在市場上推出了一系列的庫爾特計數儀(Coulter Counter),如:ZM、TA II、Multisizer II等系列型號,為科研與產品控制的實驗室顆粒/細胞的檢測提供zui可靠的分析手段。Multisizer 3 型庫爾特顆粒/細胞計數及粒度分析儀為當今所有計數儀、粒度分析儀當中分辨率zui高的儀器。

庫爾特原理(Coulter Principle)
又稱為電感應區技術。
懸浮于弱電解液中的細胞被抽吸而經過一個小孔,因產生外加電壓而形成“感應區”。細胞經過小孔時,細胞的體積替代了電解液的相應體積。因相應體積的電解液被替代,小孔感應區產生電壓脈沖而導致電阻的改變。脈沖的強度與細胞的體積成比例的關系。

Multisizer 3 先進的DPP 數碼脈沖處理器,使測量過程中的數以百萬計的脈沖信號無須經壓縮而保存。數據因無損失而能實現再分析功能。DPP的功能使得Multisizer 3能夠實時監測樣品在分析過程中的原始變化。。

DPP同樣可用于檢測細胞體積的改變。在許多的生化過程中細胞體積是一個重要的參考因素。如細胞發育、細胞周期、細胞死亡、滲透壓的補償、致病機理和吞噬作用等。Multisizer 3 可以觀測細胞粒徑與體積從幾秒到幾小時內的變化。。

DPP技術在低溫生物學中的應用
這是在冷凍過程中受滲透壓影響的細胞,其平均體積(MCV)的分布曲線和20秒內連續的脈沖峰值平均值的變化。
擇任意的脈沖群可以將一個粒度分布“分割”成多重的分布。因此,可獲得在分析全程中的某一時段的粒度分布。如圖示,可獲得細胞的平均直徑隨時間的變化。
使用Beckman Coulter 的Multisizer™ 3 庫爾特體積粒度分析儀將能方便而地測量細胞平均體積(MCV)的各種變化。


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